讀懂Biocoll細胞分離液主要特點及使用須知

更新時間：2021-01-22 | 點擊率：1208

　　Biocoll細胞分離液是由德國Biochrom公司推出的新一代分離液。它除了可分離淋巴細胞外，更常用于胰島細胞的分離。胰島細胞的移植是一種有效的糖尿病新型療法，可解決特別是I型糖尿病患者的胰島細胞不足及功能低下的問題。

　　特點：

　　1、提供多種密度的Biocoll細胞分離液，可分離外周血，骨髓和臍帶血中的單個核細胞，低密度的基質細胞，間充質干細胞以及嚙齒動物的血細胞等。

　　2、生產過程符合GMP以及美國藥典標準，無菌即用，內毒素含量低。

　　3、分離效果好，所得細胞活性>80%,Ficoll可高壓滅菌，有效期長。

　　應注意如下事項

　　分離方法會影響胰島的產率和存活率，因此，取材時需要注意

　　1.胰臟應快速取材，保持包膜完整。

　　2.建議采用UW溶液運輸。

　　3.對胰臟進行評估，在消化酶灌注前去除多余的脂肪和殘留的十二指腸和脾臟。

　　4.消化過程不宜進行震蕩，以保證胰腺組織被灌注的消化酶液消化，而不是被胰腺所釋放的胰蛋白酶消化。

　　5.要保證胰島的包膜完整，消化不能太充分。寧可不足，也不可過頭，否則會影響胰島純化的產率。

　　1.分別將7mL和10mL

　　Biocoll細胞分離液（D=1.077g/mL,20℃）放入15mL和25mL的離心管中。

　　2.將肝素化抗凝全血（50U/mL肝素,無穩定劑）與等體積培養基混合均勻，小心添加在分離液的液面上。

　　3.1200g離心20min。用巴斯德吸管吸取（70-100%）淋巴細胞富集層（位于血漿和Biocoll之間），加入培養基中洗2次，*300g離心10min.*200g離心10min，即得所需淋巴細胞，可以按常規方法進行細胞計數等實驗。