新生牛血清蛋白成分對細胞培養(yǎng)有何影響？

牛血清是常用的細胞培養(yǎng)類添加物，其中含有豐富的營養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長因子、激素、營養(yǎng)物及代謝物、脂類、礦物質(zhì)等,為細胞培養(yǎng)的順利進行提供必要的營養(yǎng)保障,尤其是新生牛血清的應(yīng)用較為廣泛。

動物血清中含有豐富的營養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長因子、激素、營養(yǎng)物及代謝物、脂類、礦物質(zhì)等,為細胞培養(yǎng)的順利進行提供必要的營養(yǎng)保障,尤其是新生牛血清的應(yīng)用較為廣泛。有科研人員通過凝膠過濾層析，以及MTT比色法沒分析新生牛血清中蛋白情況、對細胞培養(yǎng)的影響。

結(jié)果顯示：

通過層析柱后，能分辨出血清中的蛋白組分相對比較單一,該血清來源于新生牛。新生牛血清和成年牛血清在蛋白組分上是有差別的,而凝膠層析就是利用蛋白組分的大小不同來反映出不同的峰值來加以區(qū)分的。因此,如果選擇合適的層析柱,可以將血清中的不同組分區(qū)分出來,從而判斷商品新生牛血清中是否含有非新生牛血清的成分,間接評價血清的質(zhì)量。

MTT比色法的原理是根據(jù)MTT能被活細胞線粒體中脫氫酶還原成藍紫色結(jié)晶甲瓚,并沉積于細胞中,而死細胞則不能引起這種變化。甲瓚經(jīng)DMSO溶解后,可直接在酶標儀上讀取光吸收值,根據(jù)光吸收值的大小來判斷活細胞線粒體中脫氫酶與MTT結(jié)合的量,在一定范圍內(nèi)MTT結(jié)晶物的形成量與活細胞數(shù)量有線性關(guān)系，是定量檢測細胞增殖和生長的理想方法，依此原理來判斷培養(yǎng)細胞的活力和增殖狀況。本試驗通過MTT比色法評價新生牛血清、成年牛血清和商品血清對成纖維細胞和骨髓瘤細胞的促生長作用,來判斷血清的質(zhì)量狀況。通過細胞培養(yǎng)增殖的結(jié)果比較差異顯著,說明了蛋白組分是影響細胞培養(yǎng)的重要因素。蛋白組分上看是相對單一的,具有較好的促細胞生長作用，成牛血清蛋白組分上看區(qū)別較大,其促細胞生長作用不明顯。

在細胞培養(yǎng)過程中,細胞出現(xiàn)不增殖或者增殖不明顯的原因很多,其中血清質(zhì)量的選擇是不可忽視的重要因素。生產(chǎn)中血源及生產(chǎn)流程的差異,導(dǎo)致了商品血清在實際應(yīng)用中存在一定質(zhì)量上的差別。Ausbian進口新生牛血清，澳洲血源，富含各類營養(yǎng)成分。