和你聊聊胎牛血清的相關知識

許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細胞培養，在細胞培養實驗中，血清無疑成為影響實驗成功與否的重要因素，而在眾多血清之中，牛血清是尤為常用的。牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基，其中含有豐富的細胞生長所必須的營養成份，常用于動物細胞的體外培養，具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復雜的混合物，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質，多肽類，激素類，其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

牛血清根據取材時間不同而有不同的區分。

胎牛血清：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清

（1）.特級胎牛血清：40納米過濾，內毒素含量≤10EU， 血紅蛋白含量≤10mg/dl。

（2）.優等胎牛血清：經過3次100納米過濾，內毒素含量≤25EU/ml，血紅蛋白含量≤25mg/ml。

（3）.標準胎牛血清：3次100納米過濾，低內毒素， 低血紅蛋白含量。

（4）.活性碳/葡聚糖處理血清：激素含量大大降低。

（5）.透析型胎牛血清：次huang嘌呤和胸腺核苷含量大大降低。

因此，如何在使用過程中保護這些因子的活性，達到最大的細胞培養效果，就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面：

1. 正確儲存，避免反復凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應進行分裝。

3) 血清和培養基應盡可能“現用現配”，配好的培養液，應于一周內用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過久，否則會破壞血清中有效活性成分，影響血清品質。

2. 正確的融化

國際上流行的【血清融化三步法】可最大限度地保存血清中因子的活性，不會產生沉淀，同時能縮短血清融化時間。具體如下：

3. 關于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體，如果針對補體滅活的話，就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎培養基中，混合后配成*培養基。

曾有文獻報道，不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響，尤其是干細胞和原代細胞。具體最佳濃度需要用戶根據自己的實驗來確定，以既保證培養的效果，又避免血清的浪費。